Amplifikace a izolace plasmidů

V rámci molekulárních služeb provádíme amplifikaci a izolaci plasmidů. Tato služba zahrnuje transformaci dodaného plasmidu do bakterií Escherichia coli, jeho namnožení v bakteriální kultuře a následnou izolaci.

Výtěžek izolace plasmidu je závislý na mnoha faktorech, především na sekvenci pro počátek DNA replikace (tzv. místu ORI), velikosti plasmidu a vlastnostech vloženého insertu (například vložená sekvence shRNA/miRNA může výtěžek plasmidu výrazně snižovat). Pro maximální výtěžek je vhodné spolu s plasmidem dodat informaci o zařazení plasmidu do skupiny „high copy“ nebo „low/very low copy“ dle doporučení v tabulce. Při nevhodném zařazení plasmidu nemůžeme nést zodpovědnost za celkový výtěžek. V případě dodání podrobnějších informací o plasmidu (délka, název původního vektoru a mapa plasmidu) jej zařadíme do vhodné skupiny sami.

 

Cena

Dodací podmínky

Izolát plasmidu odesíláme poštou na ledu do 15 pracovních dnů od obdržení objednávky.

Plasmid je zasílán jako roztok ve sterilním TE pufru (na vyžádání ve sterilní deionizované vodě). Zákazník dále obdrží informace o koncentraci a čistotě.

 

Způsob objednání

Vyplněný objednávkový formulář můžete zaslat na e-mailovou adresu s uvedením hesla KLON do předmětu e-mailu. Můžete jej i vytisknout a zaslat společně se vzorky na naši adresu.

Další informace získáte na výše uvedené e-mailové adrese nebo telefonech +420 495 056 394 a +420 495 056 151.

 

Požadavky na materiál

Plasmid lze zaslat buď ve formě roztoku nebo jako vysušenou kapku na filtračním papírku.

  • minimální množství plasmidu v roztoku: 100 ng
  • minimální množství plasmidu na filtračním papírku: 1 µg
  • minimální čistota (A260/A280) alespoň 1,8

Od zákazníka dále potřebujeme specifikovat gen antibiotické rezistence a zařazení plasmidu do skupiny „high copy“ nebo „low/very low copy“.