Amplifikace a izolace plazmidů

Amplifikace a izolace plazmidůV rámci molekulárních služeb provádíme transformaci plazmidu dodaného zákazníkem do bakterií Escherichia coli, jeho namnožení v bakteriální kultuře a následnou izolaci. Hotové plazmidy dodáváme ve formátech midiprep a maxiprep.

 

Ceník

ProduktKatalogové čísloCena za vzorek bez DPH
Midiprep "high copy"1851-0012250 Kč
Midiprep "low/very low copy"1852-0012850 Kč
Maxiprep "high copy"1853-0013450 Kč
Maxiprep "low/very low copy"1854-0014150 Kč

 

Objednávka a dodání

Vyplněný objednávkový formulář zasílejte na e-mailovou adresu . Můžete jej i vytisknout a zaslat společně se vzorky na naši adresu. Další informace získáte na výše uvedené e-mailové adrese nebo telefonech +420 495 056 234 a +420 495 056 253.

Izolát plazmidu odesíláme poštou na ledu do 15 pracovních dnů od obdržení objednávky. Plazmid je zasílán jako roztok ve sterilním TE pufru (na vyžádání ve sterilní deionizované vodě). Zákazník dále obdrží informace o koncentraci a čistotě.

 

Výtěžek izolace plazmidu

Výtěžek izolace plazmidu je závislý na mnoha faktorech, především na sekvenci pro počátek DNA replikace (tzv. místu ORI), velikosti plazmidu a vlastnostech vloženého inzertu (například vložená sekvence shRNA/miRNA může výtěžek plazmidu výrazně snižovat). Pro maximální výtěžek je vhodné spolu s plazmidem dodat informaci o zařazení plazmidu do skupiny „high copy" nebo „low/very low copy" dle doporučení v tabulce. Při nevhodném zařazení plazmidu nemůžeme nést zodpovědnost za celkový výtěžek. V případě dodání podrobnějších informací o plazmidu (délka, název původního vektoru a mapa plazmidu) jej zařadíme do vhodné skupiny sami.

 

Typ plazmiduPříklady plazmidůVelikost plazmiduBěžný výtěžek (midiprep)Běžný výtěžek (maxiprep)

„high copy"
pUC
pBluescript
pGEM
pTZ

5 kb a méně

150-300 µg

500-1000 µg

„low/very low copy"
pBR322 a odvozené
pACYC a odvozené
pSC101 a odvozené
SuperCos
pWE15

nad 5 kb

70-160 µg

400-800 µg

 

Ověření plazmidu

Pro ověření správnosti amplifikace plazmidu nabízíme možnost restrikční nebo sekvenační analýzy za zvýhodněnou cenu.

 

Požadavky na materiál

Plazmid lze zaslat buď ve formě roztoku nebo jako vysušenou kapku na filtračním papírku.

  • minimální množství plazmidu v roztoku: 100 ng
  • minimální množství plazmidu na filtračním papírku: 1 µg
  • minimální čistota (A260/A280) alespoň 1,8

Od zákazníka dále potřebujeme specifikovat gen pro rezistenci k antibiotiku a zařazení plazmidu do skupiny „high copy" nebo „low/very low copy".