|
Přehled značení - duálně značené sondy
| Fluorescence | fluorescein (FAM) je zhášen BHQ1 quencherem | | Použití | cyklér nastavit na FAM kanál, případně nastavit excitační vlnovou délku na 494 nm a emisní vlnovou délku na 525 nm |
|
| Fluorescence | hexachlorofluorescein (HEX) je zhášen BHQ1 quencherem | | Použití | cyklér nastavit na JOE kanál, případně nastavit excitační vlnovou délku na 530 nm a emisní vlnovou délku na 556 nm |
|
| Fluorescence | cyaninové barvivo Cy3 (ex 550 nm/em 570 nm) je zhášeno BHQ2 quencherem | | Použití | cyklér nastavit na Cy3 kanál, případně nastavit excitační vlnovou délku na 470 nm (FAM) nebo lépe 530 nm, a emisní vlnovou délku na filter bandpass 570 nm nebo highpass 585 nm (585hp u cykléru RotorGene, Corbett Research) |
|
| Fluorescence | cyaninové barvivo Cy5 (ex 649 nm/em 670 nm) je zhášeno BHQ2 quencherem; | | Použití | cyklér nastavit na Cy5 kanál, případně kanál LC-Red640, nebo nastavit excitační vlnovou délku 640 nm (625 nm na cykléru RotorGene, Corbett Research) a emisní vlnovou délku na filter bandpass 660 nm |
|
| Fluorescence | rutheniové barvivo PULSAR (ex 470 nm/em 650 nm) je zhášeno BHQ2 quencherem | | Použití | PULSAR je navržen především pro multiplexní experimenty v LightCycler 1.2. U multiplexních analýz v LightCycler je potřeba nastavit F1 kanál pro FAM sondu a F3 kanál pro sondu BHQ2-PULSAR. U jiných cyklérů (např. Corbett Reseach-RotorGene) je nutné vytvořit nový kanál s excitací při 470nm and emisí při 650nm, tzn. 610 nm high pass nebo 660 nm high pass (610hp nebo 660hp). Nepoužívat 610bp! |
|
|
