gb Basic Reverse Transcription Kit
gb Basic Reverse Transcription Kit obsahuje pufr, dNTP, primery (hexamery, oligo(dT)VN) a enzym reverzní transkriptázu (M-MLV). Reverzní transkriptáza přepisuje RNA do cDNA, která je následně analyzována pomocí PCR. M-MLV reverzní transkriptáza je připravena z myšího leukemického viru Moloney.
Doporučené použití
gb Basic Reverse Transcription Kit je určen pro reverzní transkripci s použitím enzymu reverzní transkriptázy M-MLV. Přepis z RNA do cDNA (komplementární DNA) probíhá v jednom kroku (bez nutnosti předchozí denaturace), stačí pouze přidat templátovou RNA.
Parametry produktu
- Kit je připraven ve dvousložkové formě, po smíchání složek A (solution) a B (enzym) stačí pouze přidat vzorek RNA.
- Spojením obou složek vznikne 2× koncentrovaný mix dostačující pro 20 reakcí.
- Přepis z RNA do cDNA probíhá v jednom kroku, bez nutnosti předchozí denaturace.
- Vstupní množství RNA do reverzní transkripce je 100-1000 ng.
- Enzym reverzní transkriptáza je typu M-MLV, která je schopná efektivně syntetizovat molekuly cDNA do délky 13 kilobazí při optimální teplotě 42 °C.
- Ve směsi jsou oligonukleotidy poly(dT) i degenerované hexamery – kit lze tedy využít pro reverzní transkripci i RNA bez poly A konců.