gb ONCO BCR-ABL MAJOR / ABL
Detekční metoda:
one-step real-time PCR
CE IVD diagnostický kit umožňuje detekovat a kvantifikovat dva typy transkriptů varianty MAJOR fúzního genu BCR‑ABL1, a to transkripty b2a2 (podle jiné nomenklatury e13a2) a b3a2 (e14a2). Principem stanovení je jednokroková (one-step) RT-qPCR s využitím fluorescenčně značených sond. Kvantifikace fúzního transkriptu je založena na stanovení procentuálního poměru počtu kopií transkriptů BCR-ABL1 vůči počtu kopií referenčního genu ABL1. Detekce a kvantifikace fúzního i referenčního transkriptu probíhá v jedné zkumavce.
Klinické souvislosti
Fúzní gen BCR-ABL ve variantě MAJOR se vyskytuje u 95 % pacientů s chronickou myeloidní leukémií (CML) a u 25 % pacientů s akutní lymfocytární leukémií (ALL). Důsledkem této chromozomální aberace je dysregulace tyrozinkinázové kaskády vedoucí právě k manifestaci leukémie.
Odpověď pacienta na léčbu se stejně jako minimální reziduální choroba doporučuje kontinuálně monitorovat kvantifikací BCR-ABL1 transkriptů b2a2 (e13a2) a b3a2 (e14a2) ve vztahu k počtu transkriptů referenčního genu. Získané hodnoty je možné převést na mezinárodní škálu hodnocení léčebné odpovědi (IS) za použití standardu STANDARD MMR BCR-ABL MAJOR (kat. č. 3280-004) verifikovaným Národní referenční laboratoří (ÚHKT, Praha).
Parametry produktu
- obsah kitu – Assay BCR-ABL MAJOR/ABL, Master Mix BCR-ABL, kalibrační řada standardů, negativní kontrola
- reverzní transkripce a kvantifikační PCR (detekce) probíhá jednokrokově v jedné zkumavce
- detekce fúzního genu BCR-ABL1 ve fluorescenčním kanále FAM, detekce referenčního genu ABL1 v kanále HEX
- objem reakce 25 µl
- navázání na mezinárodní škálu (IS) pomocí STANDARD MMR BCR-ABL MAJOR (kat. č. 3280-004)
- součástí kitu je kalkulátor (MS Excel) umožňující snadné vyhodnocení dat
Validováno pro:
CFX96/96Touch (Bio-Rad)
Light Cycler 480/Cobas z480 (Roche Diagnostics)
QuantStudio 5 (Applied Biosystems)
RG 3000 (Corbett Research)