Amplifikace a izolace plazmidů
Provádíme namnožení plazmidové DNA v bakteriálních buňkách Escherichia coli. Jako následnou službu nabízíme linearizaci plazmidu pomocí restrikčního štěpení. Tato operace je vhodná zejména při použití plazmidu jako PCR standardu. Hotové plazmidy dodáváme ve formátech midiprep a maxiprep.
Parametry produktu
Výtěžek izolace plazmidu je závislý na mnoha faktorech, především na sekvenci pro počátek DNA replikace (tzv. místu ORI), velikosti plazmidu a vlastnostech vloženého inzertu (například vložená sekvence shRNA/miRNA může výtěžek plazmidu výrazně snižovat). Pro maximální výtěžek je vhodné spolu s plazmidem dodat informaci o zařazení plazmidu do skupiny „high copy” nebo „low/very low copy” dle doporučení v tabulce. Při nevhodném zařazení plazmidu nemůžeme nést zodpovědnost za celkový výtěžek. V případě dodání podrobnějších informací o plazmidu (délka, název původního vektoru a mapa plazmidu) jej zařadíme do vhodné skupiny sami.
Požadavky na vstupní materiál
Plazmid lze zaslat buď ve formě roztoku, nebo jako vysušenou kapku na filtračním papíru.
- minimální množství plazmidu v roztoku: 100 ng
- minimální množství plazmidu na filtračním papíru: 1 μg
- minimální čistota (A260/A280) alespoň 1,8±0,1
Od zákazníka dále potřebujeme specifikovat gen pro rezistenci k antibiotiku a zařazení plazmidu do skupiny „high copy” nebo „low/very low copy”.
Dodání
Izolát plazmidu odesíláme poštou na ledu do 15 pracovních dnů od obdržení vstupního materiálu. Plazmid je zasílán jako roztok ve sterilním TE pufru (na vyžádání ve sterilní deionizované vodě). Zákazník dále obdrží informace o koncentraci a čistotě.