gb HRM PCR Master Mix
gb HRM PCR Master Mix obsahuje enzym hot-start Taq DNA polymerázu, pufr, dNTP, MgCl2, fluorescenční barvivo (detekce v kanále FAM/Sybr) a další komponenty nutné pro provedení PCR s následnou HRM analýzou. Pro namíchání reakční směsi stačí přidat primery a templát.
Doporučené použití
gb HRM PCR Master Mix je určen pro amplifikaci DNA s následnou High Resolution Melting (HRM) analýzou. HRM analýza je účinná metoda využívaná pro genotypování, presekvenační analýzu mutací, analýzu metylací DNA aj. Je založena na disociačním chování nukleových kyselin vlivem teplotního gradientu.
Použitím barviva, které emituje fluorescenci (max. excitace při 485 nm, max. emise při 498 nm) pouze ve vazbě na dvouvláknovou DNA, lze charakterizovat i malé rozdíly v sekvenci DNA. HRM analýzu lze provést pomocí real-time PCR cykléru zařazením analýzy teplot tání s vysokým rozlišením přímo za PCR amplifikaci. Tento produkt je určen pouze pro výzkumné účely.
Parametry produktu
- PCR Master Mix je 2× koncentrovaný.
- Jedno balení obsahuje 1 ml PCR Master Mixu (dostačující pro 100 PCR reakcí o objemu 20 μl).
- PCR Master Mix obsahuje enzym hot-start Taq DNA polymerázu, dNTP, MgCl2 pufr, fluorescenční barvivo (detekce v kanále FAM/Sybr) a další komponenty nutné pro provedení PCR s následnou HRM analýzou.
- PCR Master Mix neobsahuje pasivní referenční barvivo.
- V případě, že je u daného typu cykleru nutná normalizace pomocí pasivního referenčního barviva, je možné jej přidat do reakční směsi zvlášť (viz Pasivní referenční barvivo, kat. č. 3010).
gb PCR Master Mix dle aplikace |
gb HRM |
end-point PCR, běžná amplifikace |
|
real-time PCR bez sond |
✓
|
real-time PCR s běžnými hydrolyzačními sondami |
|
real-time PCR s LNA sondami |
|
real-time PCR s hybridizačními sondami |
✓
|
real-time PCR s High Resolution Melting |
|
real-time PCR se vzorky o nízkých koncentracích |
|
PCR/real-time PCR
se vzorky s výskytem inhibitorů |
✓
|